No image available for this title

Akademik Paper

Pengaruh mutagenesis situs terarah pada gen dpe penyandi D-psikosa 3-epimerase dari Agrobacterium tumefaciens asal Indonesia terhadap aktivitas enzim



Versi Bahasa Indonesia
D-psikosa 3-epimerase (DPE) adalah salah satu enzim epimerase yang berfungsi mengkonversi D-fruktosa menjadi D-psikosa. Berdasarkan struktur tiga dimensi enzim DPE, residu yang terlibat dalam pengikatan substrat adalah I66, W112, E156, H186, dan R215, dan pengikatan logam adalah E150, D183, H209, E244, dan E150. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh mutagenesis situs terarah dari gen dpe penyandi d-psokosa 3-epimerase dari
Agrobacterium tumefaciens terhadap aktivitas enzim DPE.
Mutasi telah dilakukan pada situs asam amino ke 242 dengan mengganti kodon penyandi asam amino valin menjadi isoleusin menggunakan teknik PCR sehingga menjadi Atdpe V242I. Atdpe V242I hasil mutasi telah berhasil diklon di dalam E. coli DH5α Analisis SDS-PAGE menunjukkan bahwa Atdpe V242I telah berhasil diekspresikan di E. coli BL21 (DE3) menghasilkan enzim Atdpease V242I. Uji aktivitas enzim menunjukkan bahwa aktivitas enzim DPE V242I mengalami penurunan sebesar 27%. Penambahan ion logam Co2+ dapat meningkatkan aktivitas enzim AtDPE V242I sebesar 36,7% dan sehingga setara dengan AtDPE.

English version
D-psicose 3-epimerase (DPE) is one of the epimerase enzymes that serve to convert D-fructose into D-psicose. Based on the three dimensional structure of
DPEase enzymes, the residues involved in substrate binding are I66, W112, E156, H186, and R215, and the metal binding is E150, D183, H209, E244, and E150. The purpose of this study was to investigate the effect of site directed mutagenesis of dpe gene encoding of d-psicose 3-epimerase of Agrobacterium tumefaciens on dpease enzyme activity.
Mutations have been carried out on the 242 amino acid site by replacing codons of amino acid into isoleucine using PCR technique to become Atdpe
V242I. Atdpe V242I mutation has been successfully cloned in E. coli DH5α SDS- PAGE analysis shows that Atdpe V242I has been successfully expresse d in E. coli BL21 (DE3) produces AtDPE V242I enzyme. The enzyme activity test showed that the enzyme activity of DPE V242I decreased by 27%. The addition of Co2+ metal ions can increase AtDPE V242I enzyme activity by 36.7% and thus equal to AtDPE.

Pustakawan : S. Elly F. (klasifikasi, tajuk subjek dan kata kunci tgl 5-3-2019)


Ketersediaan

BTK05275Perpus BiotekTersedia

Informasi Detil

Judul Seri
-
No. Panggil
0432.2:602 PEN i
Penerbit Sekolah Pascasarjana IPB. : Bogor.,
Deskripsi Fisik
vii, 37 hal. : il.; 30 cm. (+ CD-ROM)
Bahasa
Indonesia
ISBN/ISSN
-
Klasifikasi
0432.2:602
Tipe Isi
-

Versi lain/terkait

Tidak tersedia versi lain




Informasi


DETAIL CANTUMAN


Kembali ke sebelumnyaXML DetailCite this